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Genes codificantes e não-codificantes: Novos alvos terapêuticos
VAMOS COLOCAR A MÃO NA PIPETA E FAZER CIÊNCIA?
Reprodutibilidade é a palavra-chave
PROTOCOLOS
Seção dedicada para a difusão de boa ciência com PROTOCOLOS detalhados aplicados no laboratório e links para outras metodologias
EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLEICOS
RNA e DNA
EDIÇÃO GÊNICA- CRISPR/Cas
Desenho de sgRNAs, clonagem e análise da eficiência
update out 2020
Clonagem de RNA-guia em plasmídeo
Metodologia baseada no paper de Ran et al, 2013, Nature Methods, no qual os sgRNAs são desenhados para que formem extremidades coesivas ao plasmideo digerido com a enzima BbsI.
https://doi.org/10.1038/nprot.2013.143
update out 202x
Ensaio de eficiência de sgRNA
T7 endonuclease
Em construção
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