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Lab Experiment

VAMOS COLOCAR A MÃO NA PIPETA E FAZER CIÊNCIA?

Reprodutibilidade é a palavra-chave

PROTOCOLOS

Seção dedicada para a difusão de boa ciência com PROTOCOLOS detalhados aplicados no laboratório e links para outras metodologias

EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLEICOS

RNA e DNA

update jan 2021

Extração de RNA total

update out 2020

Extração de DNA genômico

Em construção

update out 2020

Gel de agarose para eletroforese DNA

Em construção

update jan 2021

Gel de agarose para eletroforese de RNA total
*Análise de integridade do RNA

update jul 2021

Miniprep

Caseira

update out 2020

COMO CALCULAR A %  DE UM GEL DE AGAROSE?

Em construção

update out 2020

update out 2020

EDIÇÃO GÊNICA- CRISPR/Cas

Desenho de sgRNAs, clonagem e análise da eficiência

update out 2020

Clonagem de RNA-guia em plasmídeo

Metodologia baseada no paper de Ran et al, 2013, Nature Methods, no qual os sgRNAs são desenhados para que formem extremidades coesivas ao plasmideo digerido com a enzima BbsI.

https://doi.org/10.1038/nprot.2013.143

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update out 2026

Desenho de RNAs-guia (sgRNAs) para sistema CRISPR/Cas 

Links para os principais sites de desenho de sgRNAs, mostrando a eficiência de guias, primers para validação e off-targets

update mar 2026

Predição de Off-Targets

Ensaio de eficiência de sgRNA
T7 endonuclease 

Em construção

update mar 2026

EBOOK- FREE

CRISPR

Addgene

Ebook sobre edição gênica com CRISPR desenvolvido pela empresa Addgene que é um repositório de plasmídeos.

EXPRESSÃO PROTÉICA

Western-blotting, Imunofluorescência e Imunohistoquímica

update mar 2026

Stripping para Western-blotting

Protocolo extraído do site da ABCAM com a receita de buffers de stripping mild (médio) e harsh (forte)

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