Lab Experiment

VAMOS COLOCAR A MÃO NA PIPETA E FAZER CIÊNCIA?

Reprodutibilidade é a palavra-chave

PROTOCOLOS

Seção dedicada para a difusão de boa ciência com PROTOCOLOS detalhados aplicados no laboratório e links para outras metodologias

EXTRAÇÃO DE ÁCIDOS NUCLEICOS

RNA e DNA

update jan 2021

EXTRAÇÃO DE RNA TOTAL

update out 2020

EXTRAÇÃO DE DNA GENÔMICO

Em construção

update out 2020

GEL DE AGAROSE PARA ELETROFORESE DE DNA

Em construção

update jan 2021

GEL DE AGAROSE PARA ELETROFORESE DE RNA TOTAL

(INTEGRIDADE)

update jul 2021

Miniprep

Caseira

update out 2020

COMO CALCULAR A %  DE UM GEL DE AGAROSE?

Em construção

update out 2020

update out 2020

EDIÇÃO GÊNICA- CRISPR/Cas

Desenho de sgRNAs, clonagem e análise da eficiência

update out 2020

Clonagem de RNA-guia em plasmídeo

Metodologia baseada no paper de Ran et al, 2013, Nature Methods, no qual os sgRNAs são desenhados para que formem extremidades coesivas ao plasmideo digerido com a enzima BbsI.

https://doi.org/10.1038/nprot.2013.143

update out 2020

Desenho de RNAs-guia (sgRNAs) para sistema CRISPR/Cas 

Links para os principais sites de desenho de sgRNAs, mostrando a eficiência de guias, primers para validação e off-targets

update out 202x

Ensaio de eficiência de sgRNA

T7 endonuclease 

Em construção

update out 2020

EBOOK- FREE

Introdução a técnica de CRISPR

Tiago Campos Pereira

Livro sobre edição gênica com CRISPR editado pelo pesquisador Tiago Campos Pereira, e disponibilizado de gratuitamente pela Sociedade Brasileira de Genética (SBG)